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染的辅助诊断依据。HIV一1 p24抗原检测阴性，只表示在本试验中无反应，不能排除
HIV感染。近年来发展的p24抗原测定法免疫复合物解离（immune—cornplex disassociate，
ICD）是将血清中免疫复合物解离后通过TSA信号放大系统使用EI．ISA进行检测，使
p24抗原检测的最小检出值由原来的10pg／ml降低到O．5 Pg／ml，在HIV一1抗体阳性母
亲所生婴儿早期的诊断中与RNA检测相当，与HIV核酸检测具有可比性，具有重要的实
用价值。
（3）HIV RNA检测：通常是通过检测HIV RNA水平来反映病毒载量，直接反映病
情进展，病毒核酸检测方法可用于HIV的早期诊断，如窗口期辅助诊断、病程监控、指
导治疗方案及疗效测定、预测疾病进程等。目前常用的测定方法有逆转录PCR实验（RT～
PcR）、核酸序列扩增实验（NASBA）、分支DNA杂交实验（bDNA）等。使用高灵敏度
的实时荧光PcR技术，能够在HIV感染的前两周检测到病毒核酸。
3．其他实验室检查①cD4细胞计数。②其他机会性感染病原体病原或抗体的检测
如卡氏肺囊虫，隐孢子虫，弓形虫、病毒性肝炎及巨细胞病毒等抗体，细菌，真菌和Ka—
posi’s肉瘤、淋巴瘤的检查。
（二）梅毒病原体测定
1．暗视野显微镜检查 是诊断早期梅毒唯一快速、可靠的方法，尤其对已出现硬下
疳而梅毒血清反应仍呈阴性者意义更大。除此法外，还有直接荧光素标记抗体检查法及涂
片染色检查法。多功能显微诊断仪（multifLinctional ml‘clc‘oscopy diagrlostic’mst九linent，
MDI）是近年来国外开发的一种综合相差对比、暗视野及偏振光的可变投影显微镜，其特
点是待检查标本不需染色及任何加工处理，而是将“活的”真实的样品直接进行观察，具
有直接、方便、快速的优点。但整套仪器价格昂贵，很难普及到各个梅毒检测实验室。
2．梅毒血清学试验 诊断梅毒常要依靠血清学检查，潜伏期梅毒血清学诊断尤为重
要。人体感染梅毒螺旋体后，可产生抗梅毒螺旋体抗体IgM及IgG，也可产生反应素，用
不同的抗原来检测体内是否存在抗梅毒螺旋体抗体或反应素以诊断梅毒。①非梅毒螺旋体
抗原试验： 目前常用性病研究实验室试验（venereal disease research lat）oratory test，
VDRI。）、快速血浆反应素环状卡片试验（rapid plasma regain circle card test，RPR）及甲
苯胺红不加热血清反应素试验（syphilis toluidine red untreated serum test，TRUST）。
②梅毒螺旋体抗原试验因抗原是梅毒螺旋体，检测血清中梅毒螺旋体抗体，其敏感性和特
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异性均较高，现常用荧光螺旋体抗体吸收试验（fluorescent treponemal antibody—absorp—
tion test，FTA—ABS）及梅毒螺旋体n'n球凝集试验（treponema pallidum hemagglutina—
tion assay，TPHA）。
3．脑脊液检查对神经梅毒，尤其是无症状性神经梅毒的诊断、治疗及预后均有意
义。检查项目包括淋巴细胞≥10×10。／L，蛋白量50mg／dl，VDRL试验阳性等有诊断价
值。脑脊液PCR检测，可以快速准确的诊断神经性梅毒。
4．基因诊断技术检测梅毒螺旋体（TP—PcR）TP—PCR检测梅毒螺旋体DNA，特
异性很强，敏感性很高，是目前诊断梅毒螺旋体的先进方法。PCR检测梅毒螺旋体的
DNA，其敏感性、特异性均优于血清学方法。由于临床标本可能含有大量人细胞和微生
物，建立对梅毒螺旋体高度特异的PCR方法极为重要，但仍需进一步改进相关试剂盒。
（三）淋病病原体测定
1．涂片检查男性急性淋病直接涂片检查到多形核白细胞内革兰氏阴性双球菌即可
确定诊断，其阳性率可达95％；女性患者阴道宫颈处杂菌很多，因此女性患者及症状轻或
无症状的男性患者，均以作淋球菌培养检查为宜。
2．培养 培养法为诊断淋病的金标准。
3．POR对淋球菌培养阴性、病史及体征怀疑淋球菌感染者，亦可应用PCR检测淋
球菌DNA以协助诊断，因该法易出现假阳性结果，故目前临床上规定尚不用作常规检查。
（四）非淋菌尿道炎病原体测定
1．沙眼衣原体临床标本的直接检查 临床标本的沙眼衣原体可在敏感细胞中增生形
成包涵体，对临床标本作姬姆染色和碘染色，如发现有一定数量的具特征性的包涵体即可
作出诊断，此法操作简便易行，但仅适用于新生儿眼结膜炎刮片的检查，对NGU检查不
够敏感。
2．沙眼衣原体的培养
3．解脲支原体的分离培养
4．血清学试验
5．分子生物学方法PCR反应、荧光定量PCR反应、DNA杂交等。
（五）生殖器疱疹和尖锐湿疣病原体测定
1．生殖器疱疹病原体检测
（1）培养法：从皮损处取标本进行组织培养分离病毒，特异性强，但敏感性取决于取
材的损害，且所需技术条件高，从接种到作出鉴定需5～10天，价格昂贵。
（2）直接检测法：通常用皮损处细胞涂片直接检测病毒抗原，20min到4h可得出结
果，其敏感性达到培养法的80％。
（3）改良组织培养法：将细胞培养法与直接检测法结合起来，以便在24小时后得出
结果，其敏感性为培养法的94％～99％。
（4）？细胞学法：此法简单、快速、便宜，可广泛应用，但敏感性只有培养法的
4 0％～50％。
（5）PCR法：用此法检测皮损内HSV核酸，敏感性和特异性均很高，但目前尚限于
研究，有望能用于临床诊断。
（6）血清学方法：可用于血清流行病学调查，估计人群的感染，不能用作临床诊断。
2．尖锐湿疣病病原体检测
（1）细胞学宫颈涂片检查：常用来检测无症状宫颈人乳头瘤病毒感染，但常不敏感。
（2）5％醋酸试验：在可疑的受损皮肤上用5％醋酸涂抹或敷贴，3～5rain有尖锐湿疣
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的皮肤局部发白为阳性。该试验对诊断与指导治疗尖锐湿疣有很大价值。
（3）免疫组化检查：用带有过氧化物的抗体检查HPV抗原。所用方法有PAP法、
ABC法等。此法具有对病原进行组织定位的优点。
（4）分子生物学方法在HPV DNA监测中的应用：①DNA杂交 用以检测HPV DNA
型别。②DNA吸引转移技术 是最敏感的检测HPV DNA的方法之一。③PcR反应 检测
人乳头瘤病毒DNA灵敏度高，特异性强。④荧光定量PcR反应。⑤基因芯片技术。
（六）软下疳病原体测定
l_直接涂片从溃疡或横痃处取材涂片作革兰染色，镜下可见到革兰阴性短杆菌，
呈长链状排列，多条链平行；C‘A“鱼群状”，可考虑为杜克雷嗜血杆菌，但涂片的敏感性
大约为50％。另外溃疡中其他革兰阴性菌可造成假阳性。
2．培养标本在选择性培养基上培养，可出现典型菌落，取典型菌落作细菌涂片，
可见到革兰阴性短链杆菌。细菌经分离鉴定，可明确为杜克雷嗜血杆菌。
3．血清学检测 目前认为IgM抗体敏感性为74％，IgG抗体敏感性为94％，其特异
性分别为84％和64％。尚未得以临床推广。
4．POR反应
第六节 医院感染常见病原体检测
医院感染（nosocomial infection，hospital infection）又称院内感染或医院获得性感染
（hospital acquired in：＇ection），是指在医院发生的感染，其感染范围可分为各种病人、医院
工作人员、探视者。医院感染的发生包括3个重要的环节，即传染源的存在，传播途径和
易感人群。医院感染的发生主要有两种类型，即外源性感染（系指由患者本身以外的微生
物引起的感染），内源性感染（系指由患者本身携带的微生物引起的感染）。要对不同类型
的感染作出正确的诊断，必须进行微生物学检查。随着现代医学技术的迅猛发展，新的医
学诊疗技术的广泛应用，大量老年人群及慢性疾病患者的存在，特别是抗菌素／抗生素滥
用所导致的细菌变异耐药株的增多，使医院感染的感染源、传播途径、易感人群等都发生
了显著变化。同时，其他一些相关问题，如医院污物处理、内窥镜消毒与灭菌、安全注射
等，都使医院感染成为当今医学领域中的重要问题。
一、流行病学和临床类型 。
（一）流行病学
1．病原学细菌是最常见的病原菌。医院感染的病原菌种类繁多，以往以革兰阳性
球菌为主，但近年来发生很大变化。其变化趋势是革兰阴性杆菌比例在增加，革兰阳性球
菌比例在减少。在革兰阴性杆菌中条件致病菌占有很大比重，其中有些细菌种类在医学微
生物学中根本不加讨论，而突然变成引起医院感染的流行株，如阴沟肠杆菌、聚团肠杆
菌、洋葱假单胞杆菌、黏质沙雷菌等。嗜肺军团菌也是一种新出现的医院感染病原体，它
是在医院装备了空调机之后才出现的。医院感染的病原体，除了各种细菌外，还有病毒，
如肝炎病毒、流感病毒、疱疹病毒、风疹病毒、水痘病毒、轮状病毒、巨细胞病毒、麻疹
病毒、柯萨奇病毒等。真菌类和弓形体、肺孢子虫。1999年6月～2000年12月我国的全
国医院感染监控网数据表明，目前我国医院感染的病原体仍以革兰阴性需氧杆菌为主，占
所有分离病原菌的47．98％，居前5位的分别为铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯
菌、阴沟肠杆菌、鲍曼不动杆菌；革兰阳性菌占26．56％，以金黄色葡萄球菌、表皮葡萄
球菌、CNS、粪肠球菌、其他链球菌居前5位；真菌占24．41％。根据病原菌的来源部
的皮肤局部发白为阳性。该试验对诊断与指导治疗尖锐湿疣有很大价值。
（3）免疫组化检查�